INTRODUÇÃO

O Instituto Adolfo Lutz, provedor de programas de comparação interlaboratorial, busca a melhoria contínua deste serviço com rigor científico, estabelece como prioridade a qualidade e cumpre com os critérios descritos na ISO/IEC 17043:2010 e ILAC G13: 08/2007. Alguns aspectos desta atividade têm como base o IUPAC/ISO/AOAC Protocolo Internacional Harmonizado para Ensaios de Proficiência de Laboratórios Analíticos (Químicos) e ISO 13528. O provedor do Programa de Ensaio de Proficiência para chumbo em sangue (PEP PbS) tem o objetivo de oferecer uma ferramenta metrológica para a melhoria dos resultados de laboratórios na área de toxicologia analítica e realizam o ensaio de chumbo em sangue para a avaliação de exposição humana ocupacional e ambiental.

O chumbo pode causar diversos agravos à saúde, incluindo interferência na produção de hemoglobina, distúrbios renais e no sistema nervoso central, dificuldade de aprendizado em crianças, entre outros. A concentração de chumbo sanguíneo é o indicador biológico mais utilizado para avaliar exposições humanas recentes, de natureza ocupacional ou ambiental. A legislação brasileira para saúde ocupacional, por meio da Norma Regulamentadora 7 – (NR 7 – Programa de Controle Médico de Saúde Ocupacional, anexada à Portaria GM 3214, de 06 de junho de 1983),  estabelece o valor de 40 µg/100mL como Valor de Referência da Normalidade (valor possível de ser encontrado em populações não expostas ocupacionalmente) e o valor de 60 µg/100mL como Índice Biológico Máximo Permitido (valor máximo para o qual se supõe que a maioria das pessoas ocupacionalmente expostas não corre risco de dano à saúde). Quanto à exposição ambiental, de acordo com a Organização Mundial de Saúde - OMS, mesmo concentrações abaixo de 10 µg/100mL  podem causar danos à saúde de crianças (Exposure to Lead: A major public health concern, OMS, 2010).

A partir de 2004, este PEP foi habilitado pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Em 2011, o PEP PbS foi acreditado como Provedor de Ensaio de Proficiência (PEP 0007) pelo Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (INMETRO) segundo a norma ILAC-G:13:8:2007.

ORGANIZAÇÃO E COORDENAÇÃO

Instituto Adolfo Lutz

Centro de Contaminantes

Núcleo de Contaminantes Inorgânicos

Centro de Materiais de Referência

Coordenadores do Programa

Coordenador Técnico: Paulo Tiglea

Coordenador Técnico Substituto: Maria de Fátima Henriques Carvalho

Endereço: Avenida Doutor Arnaldo, nº 355 – Cerqueira César

São Paulo – SP – CEP 01246-902

Telefone (11) 3068 2923 - Fax (11) 3068 2924

E-mail: Este endereço de e-mail está protegido contra spam bots, pelo que o Javascript terá de estar activado para poder visualizar o endereço de email

Apoio

OBJETIVOS

O provedor tem como objetivo oferecer um programa de ensaio de proficiência para a determinação de chumbo em sangue (PEP PbS), a fim de propiciar um instrumento para a auto avaliação aos laboratórios que atuam na área de toxicologia analítica e a melhoria da confiabilidade dos seus resultados. Estabelece ainda os seguintes objetivos específicos: comparar os resultados e avaliar o desempenho dos laboratórios participantes e; fornecer uma alternativa de participação em PEP no âmbito nacional e auxiliar no processo de avaliação para a acreditação dos laboratórios participantes.

ESCOPO

A faixa de concentração de chumbo nos itens de ensaio de sangue total bovino estará entre 10 µg/100mL e 100 µg/100mL, a qual abrange os níveis de concentração importantes dos ensaios dos laboratórios que atuam na área de saúde humana e animal com o objetivo de avaliar a exposição ocupacional e ambiental.

EQUIPE TÉCNICA

Márcia Liane Buzzo – Pesquisadora Científica – IAL

Luciana Juncioni de Arauz - Pesquisadora Científica – IAL

Richard Matsuzaki - Agente de Apoio à Pesquisa Científica Tecnológica

Edna Emy K. Arakaki - Assistente Técnico de Apoio à Pesquisa Científica Tecnológica

Luci Elaine Machado - Auxiliar de Serviços

PARTICIPAÇÃO

Este PEP é aberto à participação de laboratórios públicos e privados, legalmente constituídos, que realizam o ensaio de chumbo em sangue total. Prazo de inscrição até 30/03/2012.

Os laboratórios participantes têm a responsabilidade de lerem as instruções e segui-las, antes de conduzir os ensaios. O provedor não pode assumir a responsabilidade sobre qualquer problema decorrente da falha em atender às instruções.

CONFIDENCIALIDADE

Todas as informações fornecidas pelo laboratório participante ao provedor são tratadas de forma confidencial. Em circunstâncias excepcionais, por solicitação de autoridades regulamentadoras ou de acreditação, o provedor fornece os resultados diretamente a estas autoridades. Nestes casos, esta ação é notificada por escrito aos laboratórios envolvidos. O laboratório enviará um acordo também por escrito.

Os laboratórios são identificados por códigos aleatórios que se altera a cada rodada do programa. O código de identificação do laboratório será enviado para o responsável do laboratório participante, ou seu substituto, e sua divulgação é de responsabilidade do mesmo. O provedor pode divulgar os resultados do programa em eventos e revistas científicas, mantendo o sigilo dos laboratórios participantes.

DOCUMENTOS DO PROGRAMA

Além deste protocolo, os seguintes documentos serão disponibilizados no sítio eletrônico do IAL.

-        Ficha de inscrição;

-        Formulário de Recebimento do Item de Ensaio;

-        Formulário de Registro de Resultados.

-        Relatório

Quando a comunicação eletrônica não for possível, alternativamente o modelo impresso pode ser fornecido e enviado via correio ou fax. Se necessário, documentos com instruções de recebimento, prazo e de envio dos resultados podem acompanhar as amostras ou podem ser enviados por correio eletrônico.

ITENS DE ENSAIO

O sangue bovino contendo anticoagulante (ácido etilenodiaminotetracético – EDTA) é filtrado, adicionado de conservante, fortificado com solução aquosa de chumbo e em seguida homogeneizado. Os itens de ensaio são envasados em frascos de polipropileno, contendo aproximadamente 12 mL do material.

O provedor realiza os testes de homogeneidade e estabilidade antes do envio dos itens de ensaio. A coordenação poderá adiar ou cancelar a rodada, caso as amostras não se apresentem suficientemente homogêneas e estáveis, antes de sua distribuição. Neste caso, os participantes serão informados por escrito.

ENVIO DE ITENS DE ENSAIO

A cada rodada, serão enviados aos participantes quatro itens de ensaio devidamente identificados acondicionados em tubos de polipropileno com tampa rosqueável, contendo aproximadamente 12 mL de sangue, protegidos por plástico bolha e acondicionados em caixa de isopor. O envio ocorrerá por correio (SEDEX).

O participante deverá realizar a inspeção dos itens de ensaio no ato do recebimento.

A ocorrência de problemas com os itens de ensaio, tais como, perdas ou deterioração que possam invalidar os resultados deve ser comunicada de imediato para que haja tempo hábil para a substituição, sem comprometimento do prazo de duração da rodada.

O provedor informa que pode fornecer itens de ensaio excedentes apenas nos casos de perdas ou deterioração dos itens de ensaio, durante o transporte.

MANUSEIO E ARMAZENAMENTO DOS ITENS DE ENSAIO

É recomendável que os laboratórios tratem os itens de ensaio do programa de maneira semelhante à maioria das amostras ensaiadas na rotina.  

Embora o material de ensaio seja preparado a partir de sangue bovino de animais considerados sadios, destinados ao abate para consumo humano, por medida de segurança, os analistas devem manuseá-lo usando equipamentos de proteção e aplicando procedimentos de biossegurança adequados, como se o material fosse capaz de transmitir doenças.

Após o recebimento, os itens de ensaio devem ser conservados sob refrigeração.

TESTES DE HOMOGENEIDADE E ESTABILIDADE

A avaliação da homogeneidade é realizada antes do envio dos itens de ensaio utilizando-se procedimento estatístico descrito na ISO 13528 (International Organization for Standardization ISO 13528:2005 Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons).

O provedor também efetua o estudo de estabilidade dos itens de ensaio, visando garantir a sua estabilidade até a conclusão da rodada.

CRONOGRAMA

MÉTODOS DE ENSAIO

Os laboratórios participantes podem utilizar procedimento analítico de sua escolha, sendo recomendável o método analítico utilizado na rotina dos seus ensaios. O chumbo deverá ser determinado em três (3) replicatas independentes de cada item de ensaio enviado.

REGISTRO DOS RESULTADOS

Os resultados e outras informações pertinentes serão reportados no Formulário de Registro de Resultados. Os laboratórios devem ler as orientações para registro dos resultados no formulário. O arquivo, com a planilha deve ser protegido com senha antes de ser enviado à coordenação do PCI até (). Os resultados que não forem protegidos por senha não serão avaliados. Em casos de dúvidas quanto ao preenchimento dos formulários ou envio, o participante poderá entrar em contato com a coordenação do PEP PbS: Este endereço de e-mail está protegido contra spam bots, pelo que o Javascript terá de estar activado para poder visualizar o endereço de email .

Os participantes devem enviar os resultados dentro do prazo e seguir as instruções para registrar os resultados, caso contrário, não serão incluídos na avaliação.

Deverão ser registrados três resultados para cada item de ensaio. A concentração do chumbo deve reportada pelo laboratório em µg de Pb por 100 mL de sangue total, com uma casa decimal. Será necessário também o preenchimento dos campos relativos ao método e à técnica analítica empregados na determinação.

ANÁLISE DOS RESULTADOS

O método estatístico empregado para a avaliação dos resultados do PEP PbS classifica o desempenho de cada laboratório segundo o índice z, conforme descrito a seguir.

Cálculo do Valor Designado

O valor designado é tomado como o consenso dos resultados dos laboratórios participantes da rodada. O PEP PbS utiliza como valor designado a média robusta, obtida por procedimentos iterativos, em ciclos, de acordo com os passos descritos a seguir.

1.     Exclusão dos dados quaisquer valores médios dos laboratórios que tenham sido identificados como inválidos, isto é, expressos em unidades erradas ou obtidos por métodos proscritos, ou ainda, os valores médios dos laboratórios que não enviaram 3 resultados.

2.     Cálculo da média dos resultados de cada laboratório (, i = 1, ..., i).

3.     Classificação das médias em ordem crescente.

4.     Cálculo da mediana x* e desvio padrão s* das médias dos resultados dos laboratórios incluídos, de acordo com as equações 1 e 2.

Equação 1 –   x* = mediana de x_i

Equação 2 –  s* = 1,483med|x_i – x*|,

onde x_i é a média dos resultados de cada laboratório e

med|x_i – x*| é a mediana das diferenças entre os resultados dos participantes e a média robusta (x*) inicial.

5.      Cálculo do fator f,  de acordo com a equação 3, para determinação dos limites de aceitação de resultados de acordo com as equações 4 e 5.

Equação 3 –   f  = 1,5.s*

Equação 4 –  valor superior = x* + f

Equação 5 –  valor  inferior =  x* -  f

6.     Os valores individuais dos laboratórios, x_i , são comparados ao valor superior e ao inferior. Os resultados acima do valor superior ou abaixo do inferior são considerados dispersos e são corrigidos, sendo substituídos pelo valor superior ou pelo valor inferior, respectivamente. Este procedimento encerra o primeiro ciclo. Inicia-se um novo ciclo, de acordo com os passos descritos a seguir.

7.     Cálculo da média do conjunto de resultados, incluindo os valores corrigidos, de acordo com a equação 6.

 Equação 6 –         ,

onde x* é a nova média robusta do conjunto de dados.

8.     Cálculo do desvio padrão do conjunto de resultados, incluindo os valores corrigidos, de acordo com a equação 7.

Equação 7 –                       

9.     Cálculo do novo desvio padrão robusto (s*), usando a equação 8.

s* = 1,134.s

10.  Novo cálculo de f, do valor superior e do valor inferior, de acordo com as equações 3, 4 e 5, respectivamente, sendo os valores dispersos substituídos pelos novos limites, de modo análogo ao passo 6.

11.  Outro ciclo é iniciado e o procedimento prossegue até que dois valores consecutivos da média robusta x* (e igualmente para o desvio padrão robusto s*) convirjam, isto é até que não haja diferença em duas iterações consecutivas, no terceiro algarismo significativo.

12.  Quando a convergência dos valores é alcançada, obtemos a média robusta definitiva (que será o valor designado) e o desvio padrão robusto.

Avaliação de desempenho dos laboratórios

O desempenho de cada laboratório é avaliado segundo o índice z, calculado de acordo com a equação 8.

Equação 8 –                        ,, onde

x_i = média dos valores relatados pelo participante i,

x* = valor designado, e

     = desvio aceitável, obtido de acordo com o valor designado. Se o valor designado for superior a 40 mg/100mL,       =   7,5% do valor designado. Se o valor designado for inferior a 40 mg/100 mL,      =  3 mg/100 mL.

Os desempenhos dos laboratórios são classificados de acordo com o índice z, como descrito a seguir.

|z| ≤ 2             desempenho satisfatório

2 < |z| < 3       desempenho questionável

|z| ≥ 3             desempenho insatisfatório

RELATÓRIO

Os laboratórios participantes terão acesso ao relatório preliminar do PEP PbS em 22/06/2012 no sitio eletrônico do IAL e terão até 29/06/2012 para enviarem por escrito suas considerações e contestações contra a avaliação de desempenho à coordenação. O relatório final será divulgado em 11/07/2012.

RECLAMAÇÕES E CONTESTAÇÕES

O PEP PbS tem políticas e procedimentos que permitem tratamento e soluções das contestações contra a avaliação de desempenho do programa e compromete-se a corrigir prontamente qualquer equívoco que tenha cometido. Se o laboratório tiver dúvida sobre algum aspecto do PEP PbS, deve entrar em contato com a coordenação Este endereço de e-mail está protegido contra spam bots, pelo que o Javascript terá de estar activado para poder visualizar o endereço de email . As reclamações e contestações serão avaliadas e, quando pertinentes, incluídas no relatório final.

SERVIÇOS SUCONTRATADOS

Nenhuma atividade do PEP PbS é subcontratada.

ATENDIMENTO AO PARTICIPANTE

O provedor tem disponibilidade para cooperar com os laboratórios participantes e outros clientes, no atendimento às solicitações, contestações, reclamações, dúvidas e sugestões encaminhadas por escrito. O provedor também busca a avaliação dos participantes, tanto positiva quanto negativa, com o objetivo de aperfeiçoar o sistema de gestão do Programa e os serviços prestados aos clientes. O participante será comunicado sobre eventuais alterações no programa e outras informações podem ser obtidas por e-mail: Este endereço de e-mail está protegido contra spam bots, pelo que o Javascript terá de estar activado para poder visualizar o endereço de email ou por telefone (11) 3068-2923/2924.

TAXA DE PARTICIPAÇÃO